自從阿伯拉罕（克里斯·克里斯托弗森飾）被吸血鬼綁架后，日行者刀鋒（韋斯利·斯奈普斯飾）持續(xù)追蹤其下落，最終在東歐將其救出。這段期間，刀鋒與人類武器專家斯加德建立合作關(guān)系。吸血鬼長(zhǎng)老因新型變種生物"收割者"的出現(xiàn)被迫求和——該物種以人類與吸血鬼為共同獵物，其失控的新陳代謝使其捕食頻率遠(yuǎn)超常規(guī)。在長(zhǎng)老之女內(nèi)紗（蕾奧娜·維埃拉飾）的引薦下，刀鋒聯(lián)合吸血鬼精英部隊(duì)"血幫"展開圍剿行動(dòng)，并與亞洲刺客雪人（甄子丹飾）建立臨時(shí)同盟。隨著調(diào)查深入，發(fā)現(xiàn)收割者實(shí)為吸血鬼研究員艾瑞克·布魯克斯通過(guò)基因?qū)嶒?yàn)制造的產(chǎn)物，而內(nèi)紗的真實(shí)目的是借助刀鋒之力復(fù)活收割者之父。最終刀鋒識(shí)破陰謀，與人類軍隊(duì)及反叛吸血鬼勢(shì)力聯(lián)手，在摧毀布魯克斯實(shí)驗(yàn)室的同時(shí)終結(jié)了收割者的進(jìn)化鏈，迫使兩大對(duì)立種族首次達(dá)成真正的停戰(zhàn)協(xié)議。